方法提要

样品经甲醇水溶液超声提取后，采用高效液相色谱系统分离，二极管阵列检测器（DAD），根据保留时间定性，峰面积定量，以标准曲线法计算含量。

本方法中凝血酸（氨甲环酸）的检出限为22.2 ng，定量下限为48.0 ng, 以取样量为0.5 g计时，检出浓度为22.2 μg/g和最低定量浓度为48.0 μg/g。

试剂和材料

除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。

2.1  甲醇，色谱纯。

2.2  磷酸二氢钾。

2.3  磷酸，优级纯

2.4  5 % 甲醇溶液：移取25 mL甲醇（3.1）加水至500 mL ，混匀，即得。

2.5  凝血酸（氨甲环酸）标准品（纯度大于97%）

2.6  0.05 mol/L KH2PO4—0.2% H3PO4溶液：取KH2PO4 6.8g，加水1000 mL使溶解，加入2 mL H3PO4, 混匀即得。

2.7  标准储备溶液

精密称取10 mg的凝血酸（氨甲环酸）标准品于10 mL容量瓶中，用超纯水溶解并定容，配制成1 mg/mL 的标准储备溶液，4 ℃避光保存1个月。

仪器和设备

3.1  高效液相色谱仪，二极管阵列检测器（DAD）。

3.2  分析天平，感量分别为0.1 mg、0.01 mg。

3.3  高速离心机（转速≥14000 r/min）。

3.4  超声波清洗器。

3.5  涡旋振荡器。

3.6  台式pH计。

3.7  微孔滤膜（0.22 μm）

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