拉姆化妆品检测|光反应性活性氧(ROS)测定试验方法
发布:拉姆化妆品检测时间:2024-08-23

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范围

本方法规定了化妆品用化学原料光反应性活性氧(ROS)测定试验的基本要求和方法。

本方法适用于预测化妆品用化学原料的潜在光毒性。

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实验目的

预测化妆品用化学原料是否具有潜在光毒性。


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试剂和材料

除另有规定外,本方法所用试剂均为分析纯或以上规格,水为 GB/T6682规定的一级水。所有试剂应在配制后1个月内使用,并且在使用前应超声处理,以免物质析出、沉淀对试验造成影响。主要试剂配制方法如下:

3.1  磷酸二氢钠。

3.2  磷酸氢二钠。

3.3  N,N-二甲基-4-亚硝基苯胺(RNO)。

3.4  咪唑。

3.5  氯化硝基四氮唑蓝(NBT)。

3.6  pH 7.4的20 mmol/L磷酸钠缓冲液(NaPB)

3.7  0.2 mmol/L N,N-二甲基-4-亚硝基苯胺(RNO,CAS:138-89-6)

3.8  0.2 mmol/L咪唑(CAS:288-32-4)

3.9  0.4 mmol/L 氯化硝基四氮唑蓝(NBT,CAS:298-83-9)

3.10  溶剂的选择

3.11  待测化学物质溶液的配制

3.12  阴性对照及阳性对照

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仪器和设备

4.1  太阳光模拟器

4.2  反应容器

4.3  酶标仪。

4.4  UVA紫外照度计。

4.5  显微镜。


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分析步骤

5.1  将下列成分在避光条件下混合:

5.1.1  溶剂为DMSO的受试物:

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以20 μL溶剂替代受试物,作为空白对照。涡旋或超声5~10 min后,将200 μL反应混合物加入到96孔板中,每组设置3个平行。96孔板加样详见附录D。

5.2  在100倍显微镜下检查反应混合物中各组分溶解情况。如有沉淀、析出等现象,需降低受试物浓度重新检测或停止检测。将96孔板震荡5 s后,使用分光光度计或酶标仪测定光照前SO检测孔在440 nm下的吸光度及SA检测孔在560 nm下的吸光度。

5.3  将96孔板置于石英反应器中,或盖上其他具有高UV透射率的盖子或密封件,置于太阳光模拟器中照射1 h。记录光照前后的温度。

5.4  完成光照后,将96孔板震荡1 min,使用分光光度计或酶标仪测定光照后SO检测孔在440 nm下的吸光度及SA检测孔在560 nm下的吸光度。


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公司简介

拉姆实验室是由以色列化学博士拉伊达尔.巴克和美国化学博士姆贝理、大卫.凯恩2012年在上海张江创立的实验室,主攻精细化学品及助剂应用技术的开发,2020年英丽股份收购重组了这个很有创新能力的实验室。实验室下设拉姆应用技术研发中心、拉姆快测、拉姆联合实验室,新公司提供产品标准检测、成分解析、性能测试、委托研发、产品认证,公司业务重点发展精细化学品及助剂、塑胶及工程新材料、农化及动植物保护、环境检测及治理、医疗健康及美容五大领域,努力成为中国精细化学品领域应用技术开发和检测的领导者。
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