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范围

本方法规定了测定染发类化妆品中32种禁限用染料成分（见附录A）的高效液相色谱法。

本方法适用于染发类化妆品中32种禁限用染料成分的含量测定。化妆品中的染料成分以多种形式存在，如硫酸盐、盐酸盐等，当各种形式同时存在时，应以其中的一种形式表示。

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原理

用无水乙醇+水=1+1的混合溶液提取染发类化妆品中的32中禁限用染料成分，用高效液相色谱仪进行分析，以保留时间和紫外吸收光谱定性，峰面积定量。本方法中32种禁限用染料成分的检出限、定量下限及取0.5g样品时的检出浓度及最低定量浓度见表1。

表1  32种禁限用染料成分的检出限、检出浓度、定量下限、最低定量浓度

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试剂和材料

 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为一级实验用水。

3.1  无水乙醇。

3.2  甲醇，色谱纯。

3.3  乙腈，色谱纯。

3.4  亚硫酸氢钠。

3.5  磷酸溶液（1+9）：吸取磷酸（ρ20=1.69g/mL）10mL，加水90mL。

3.6  磷酸盐混合溶液：称取十二水合磷酸氢二钠1.8g、磷酸二氢钾2.8g和庚烷磺酸钠（C7H15SO3Na）1.0g，用水稀释至1L，混匀，配制成含庚烷磺酸钠（1g/L）的磷酸盐缓冲液，加入磷酸溶液（3.5），调节pH至6，0.45µm微孔滤膜过滤。

3.7  染料类化合物标准储备溶液（ρ（染料成分）=10g/L）：称取染料对照品约100mg（精确至0.1mg）于10mL容量瓶中，以2g/L亚硫酸氢钠水溶液 + 无水乙醇（3.1）=1+1的混合溶液定容至10mL，配成约10g/L的单标溶液。以下几种物质在上述溶剂中的溶解性较差，分别采取如下措施：甲苯-2,5-二胺硫酸盐和2-氯-p-苯二胺硫酸盐2种物质直接用2g/L亚硫酸氢钠水溶液溶解并定容；甲苯-3,4-二胺直接用无水乙醇（3.1）定容；2-硝基-p-苯二胺和4-硝基-o-苯二胺需将称样量减至25mg，再用无水乙醇（3.1）定容，配成约2.5g/L的单标溶液。储备液保存于0℃～4℃冰箱中，最多使用2天。

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仪器和设备

4.1  高效液相色谱仪，具有二极管阵列检测器。

4.2  分析天平，感量为0.0001g。

4.3  分析天平，感量为0.001g。

4.4  精密pH计，精度0.01。

4.5  超声波清洗器。

4.6  离心机。

4.7  涡旋混合仪。

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